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液相色譜法檢測動物油中苯并芘

　　苯并芘是最具代表性的國際公認的強致癌物，幾乎不溶于水，可溶于苯、甲苯和環(huán)己烷，微溶于乙醇和甲醇�？赏ㄟ^呼吸、攝入和接觸等途徑進入人體，可損傷生殖系統(tǒng)，易導致皮膚癌、肺癌、上消化道腫瘤、動脈硬化和不育癥等疾病。苯并芘在自然界中廣泛存在，在油料加工和油脂生產(chǎn)中的不當操作以及苯并芘的親酯能力可能使其污染食用油。

　　1. 原理

　　樣品經(jīng)溶劑溶解，通過氧化鋁柱吸附，用洗脫劑洗脫苯并(a)芘，用反相高效液相色譜分離，熒光檢測器檢測。

　　2. 試劑和材料

　　高純水

　　石油醚

　　乙腈

　　四氫呋喃

　　甲苯

　　無水硫酸鈉

　　中性氧化鋁

　　3. 儀器和設備

　　玻璃層析柱

　　恒溫水浴

　　旋轉蒸發(fā)儀

　　Hanon LC7000高效液相色譜儀

　　4. 試樣的制備

　　4.1 樣品的凈化

　　用玻璃燒杯稱取約0.4g試樣，精確到0.001g，用2ml石油醚溶解稀釋。

　　向層析柱中加一半高度的石油醚，快速稱取22g氧化鋁與小燒杯中，立即轉移到層析柱中，輕輕敲打層析住，使氧化鋁均勻沉淀。再裝入一層約30mm高度的無水硫酸鈉。

　　向層析柱中移入樣品溶液，加80ml石油醚洗脫，洗脫液前20ml棄去，換用圓底燒瓶收集其余洗脫液。

　　將收集的洗脫液在65℃的水浴中旋轉蒸發(fā)至約1ml，移至玻璃樣品瓶中用氮吹儀吹干，4℃儲存?zhèn)溆谩?/P>

　　5. 樣品的測定

　　5.1 色譜條件

　　a)保護柱：Lichrosorb RP-C18，4.6mm×75mm，粒度5μm;

　　b)色譜柱：多環(huán)芳烴分析柱，4.6mm×250mm;

　　c)進樣量：20μl;

　　d)流動相：乙腈：水=88:12

　　e)流速：1ml/min;

　　f)熒光檢測器：發(fā)射波長：406nm，激發(fā)波長：384nm (狹縫均為10nm)

　　5.2 樣品分析

　　向裝有待測試樣的玻璃樣品瓶中加入乙腈溶液溶解樣品，經(jīng)孔徑為0.45μm的有機濾膜過濾后，待上機測試。

　　5.3 液相圖譜

液相色譜法檢測動物油中苯并芘

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