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食品中人工合成著色劑的檢測

　　合成色素以苯、甲苯、萘等化工產(chǎn)品為原料，經(jīng)過磺化、硝化、鹵化、偶氮化等一系列有機(jī)反應(yīng)制成合成著色劑，合成著色劑有一定毒性，過多食用會危害人體健康，但由于人工合成著色劑成本低、色澤鮮艷、著色力強(qiáng)、色調(diào)多樣，故被廣泛使用;合成著色劑有嚴(yán)格的控制使用范圍和最大使用量，因此食品中合成色素的準(zhǔn)確測定具有重要意義。

　　對于食品中合成著色劑的檢測目前可借鑒國標(biāo)GB/T 5009.35-2003《食品中合成著色劑的測定》，分別采用高效液相色譜法，薄層色譜法，示波極譜法進(jìn)行定性定量分析，其中高效液相色譜法前處理采用聚酰胺吸附法或液-液分配法進(jìn)行色素提取。

　　海能儀器在參考國標(biāo)的基礎(chǔ)上，推出食品中人工合成著色劑的解決方案，該方案前處理采用聚合物基質(zhì)親水親脂平衡反相固相萃取柱進(jìn)行色素的提取，比國標(biāo)方法更簡便易行，提取效率更高，凈化效果更好;同時對高效液相色譜檢測方法進(jìn)行了改進(jìn)，采用反相色譜柱，梯度洗脫檢測食品中人工合成著色劑，分離效果更優(yōu)異，增加定性定量的準(zhǔn)確性。

　　該方案特別適用于食品中檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、誘惑紅和亮藍(lán)等人工合成著色劑的檢測。以下為迪馬科技開發(fā)的食品中人工合成著色劑的檢測解決方案，供您參考!

　　1 樣品準(zhǔn)備

　　1.1 可樂樣品

　　取1 g可樂(加熱超聲驅(qū)除二氧化碳)，40 μL甲酸于試管中，搖勻，作為上樣液待凈化。

　　1.2 紅薯粉樣品

　　(1) 取2 g樣品與20 mL提取劑*混合，渦旋2 min，超聲提取10 min，6000 rpm下離心3 min，收集上清液;

　　(2) 將下層殘留物依次用10 mL、10 mL提取劑重復(fù)提取兩次，合并三次提取上清液;

　　(3) 將上清液在45℃水浴條件下，減壓蒸餾至6 mL，再加入80 μL甲酸，混勻，待凈化。

　　提取劑*：氨水+70%乙醇(1+99，體積比)。

　　2 SPE柱凈化——ProElut PLS 500 mg/6 mL(Cat.#：68005)

　　2.1 可樂樣品SPE柱凈化流程

　　(1) 活化/平衡：

　　5 mL甲醇活化，5 mL水平衡，流出液棄去;

　　(2) 上樣：

　　將待凈化液加入小柱，流出液棄去;

　　(3) 淋洗：

　　5 mL 2%甲酸水溶液，流出液棄去，將小柱抽干;

　　(3) 洗脫：

　　4 mL 2%氨水-甲醇溶液洗脫，收集流出液，2%氨水-甲醇溶液調(diào)至中性;

　　(4) 重新溶解：

　　在40 ℃下用減壓蒸餾將收集液濃縮至近干，然后用50%甲醇水溶液定容至1 mL后供HPLC分析。

　　2.2 紅薯粉樣品SPE柱凈化流程

　　(1) 活化：

　　5 mL甲醇，5 mL水活化;

　　(2) 上樣：

　　加入待凈化液，棄去流出液;

　　(3) 淋洗：

　　加入4 mL水，棄去流出液，將SPE柱抽干;

　　(4) 洗脫：

　　加入6 mL 2%氨水甲醇溶液，收集流出液;

　　(5) 重新溶解：

　　將洗脫液在45 ℃下氮?dú)獯抵良s0.5 mL，再用水定容至1 mL，微孔濾膜過濾后供HPLC分析。

　　3 分析條件

　　色譜柱：

　　Inspire C18，250 × 4.6 mm，5 μm

　　流速：

　　1.0 mL/min

　　檢測器：*

　　UV 254 nm

　　柱溫：

　　35℃

　　進(jìn)樣量：

　　20 μL

　　流動相：

　　A：乙腈，B：0.02 mol/L 乙酸銨溶液

　　梯度

時間（min）

0

20

30

31

40

A（%）

5

30

37

5

B（%）

95

70

63

95

　　4添加回收結(jié)果

　　4.1 紅薯粉添加回收結(jié)果

　　紅薯粉中人工合成著色劑(添加水平為5 mg / kg)的添加回收結(jié)果

目標(biāo)物

檸檬黃

莧菜紅

胭脂紅

日落黃

誘惑紅

亮藍(lán)

回收率

83.46%

83.18%

87.84%

94.59%

93.90%

101.28%

　　4.2可樂添加回收結(jié)果　　

分析物

添加水平(mg/kg)

回收率/%

RSD(n*=4)/%

檸檬黃

1.6

97.9

3.77

莧菜紅

2.4

97.1

2.77

靛藍(lán)

2.4

72.3

3.73

胭脂紅

3.2

98.2

1.31

日落黃

2.8

90.8

2.19

亮藍(lán)

10.4

96.5

0.84

赤蘚紅

7.2

90.7

2.49

　　*n：平行樣品的數(shù)量

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