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全自動凱氏定氮儀測定食品中蛋白質

全自動凱氏定氮儀測定食品中蛋白質

蛋白質為復雜的含氮有機化合物,是由各種氨基酸以肽鍵連接而成,所含元素主要為碳、氫、氧、氮及硫等。各類食物的蛋白質含量很不均勻,其中蛋白質含量測定是評價食物營養(yǎng)價值的重要指標之一。蛋白質含量測定方法很多,如雙縮脲法、Lowry 法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、電流法等,但存在操作比較繁瑣、費時或儀器昂貴等不足之處,通常采用經典的凱氏定氮法仍是食品分析、營養(yǎng)和生化研究中最廣泛應用而較精確的方法,但操作也比較費時費力,近來已有特用的蛋白質分析儀。K9860N全自動凱氏定氮儀是目前國內最先進的定氮儀,它不僅省時省力,而且數據準確可靠,便于檢測、分析研究。

1材料與方法

1.1儀器與試劑
1.1.1K9860N全自動凱氏定氮儀(濟南海能儀器有限公司);
1.1.2樣品消化器:SH520石墨消解儀(濟南海能儀器有限公司);
1.1.3鹽酸標準溶液:0. 1069 mmol/L ,1. 0690 mol/L 鹽酸標準儲備液100 mL 加水定容至1000 mL ;
1.1.4氫氧化鈉溶液400 g/L ,4000 g 氫氧化鈉溶于10 L水;
1.1.5濃硫酸(分析純);
1.1.6含溴甲酚綠和甲基紅指示劑的1 %硼酸吸收溶液,取100 g硼酸溶于10 L,添加100 ml溴甲酚綠溶液(100 mg溴甲酚綠溶于100 mL乙醇溶液)70 mL甲基紅溶液(100 mg甲基紅溶于100 mL乙醇溶液);
1.1.7銅催化劑“KJ ELTABS CU/ 3. 5”,瑞典FOSS TECATOR公司。

1.2測定方法 
稱取樣品放入消化管, 10ml 左右濃硫酸慢慢搖動將樣品浸濕。把消化管放入已預熱至420 ℃的消化器,大約30 - 60 min 樣品消化呈透明藍綠色液體,取出冷卻15- 20 min ,將消化管放入K9860N全自動凱氏定氮儀蒸餾器,關上安全門,待儀器自動蒸餾、滴定、計算并打印結果。
 
2、結果與討論
 
2. 1精密度測定
    取蛋白質含量不同的6 種樣品,每一種樣品平行測定6,測定結果的相對標準偏差(RSD) 均小于2 % ,表明K9860N全自動凱氏定氮儀的精確度良好;
 
  2. 2準確度測定
    蛋白質含量不同的6 種樣品,進行加標(硫酸亞鐵銨) 回收試驗 ,硫酸亞鐵銨的回收率在99 %以上,表明K9860N全自動凱氏定氮儀準確度良好;
 
  2. 3方法對比
    K9860N全自動凱氏定氮儀和經典的凱氏定氮法分別對6種樣品測定其蛋白質含量,結果表明,兩種方法對同一樣品的測定結果無差異顯著性( t = 1. 0 ,P > 0. 05) 。
 
3、小結
    由上述實驗結果,我們看出K9860N全自動凱氏定氮儀具有操作簡便快速、省時省力準確度高、精密度高等特點。它與經典的凱氏定氮法作比較,測定食品中蛋白質含量,結果令人滿意。

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